CAUSAS DE MORTALIDADE DE PINGÜINS EM CENTRO DE RECUPERAÇÃO DE ANIMAIS MARINHOS ENTRE JANEIRO DE 2004 E SETEMBRO DE 2006

OSÓRIO, Luiza da Gama1; XAVIER, Melissa Orzechowski2; CABANA, Ângela Leitzke3; MEINERZ, Ana Raquel Mano4; MADRID, Isabel Martins2; SOARES, Mauro5; SCHRAMM, Renata5; LEITE, Alice6; SILVA-FILHO, Rodolfo Pinho6; MEIRELES, Mário Carlos Araújo5

1Bolsista de Iniciação Científica – PIBIC/CNPq – UFPel – e-mail: lu.g.osorio@bol.com.br
2Programa de Pós-graduação em Veterinária – UFPel
3Curso de Medicina Veterinária – Faculdade de Veterinária –  UFPel
4Programa de Pós-graduação em Ciências Veterinária – UFRGS
5Faculdade de Veterinária – Doenças Infecciosas – UFPel
6Centro de Recuperação de Animais Marinhos – Rio Grande - FURG

1. INTRODUÇÃO
Pingüins são aves marinhas da família Spheniscidae, amplamente distribuídos no Hemisfério Sul. Exemplares de algumas espécies destas aves são freqüentemente visualizados no litoral sul do país (Wikipédia, 2006), e quando encontrados na costa são conduzidos a centros de reabilitação, a fim de serem re-introduzidas à natureza. Durante o processo de reabilitação muitas das doenças que acometem pingüins estão associadas aos patógenos locais e aos fatores estressantes do cativeiro e da captura (Clarke & Kerry, 1993).
Dentre as doenças de maior importância nessas aves em recuperação estão a aspergilose e a malária, porém existem outras desordens como bumblefoot, doenças víricas, outras doenças fúngicas, parasitárias e bacterianas, e alterações não infecciosas como traumas, desidratação, intoxicação por óleo, distúrbios nutricionais e caquexia que interferem e dificultam o processo de reabilitação (Clarke & Kerry, 1993; Fowler & Cubas, 2001).
A aspergilose é a doença fúngica mais comum em pingüins de cativeiro, causada por Aspergillus spp., sendo o A. fumigatus responsável por 90-95% dos casos (Clarke & Kerry, 1993; Carrasco, 2001; Fowler & Cubas, 2001). Os conídios infectantes provêm do ambiente e penetram no organismo principalmente por via aérea, afetando o sistema respiratório destas aves marinhas (Berchieri & Macari, 2000). 
A malária, doença causada por protozoários do gênero Plasmodium e transmitida pela picada da fêmea do mosquito do gênero Anopheles, é a parasitose mais importante em pingüins de cativeiro, sendo os pingüins juvenis mais suscetíveis Diebold et al. (1999). 
Uma vez que o Centro de Recuperação de Animais Marinhos (CRAM) de Rio Grande desempenha um papel fundamental na reabilitação de pingüins encontrados no litoral brasileiro, o trabalho objetivou caracterizar as causas de mortalidade destas aves marinhas no CRAM durante o período de 33 meses. 

2. MATERIAL E MÉTODOS
	Durante o período de 33 meses, compreendidos entre janeiro de 2004 e setembro de 2006, 25 pingüins vieram a óbito no CRAM. Entre esses animais 15 eram provenientes da Fundação Jardim Zoológico de Niterói (ZOOnit) e 10 encontrados em monitoramento no litoral sul do Rio Grande do Sul. 
Foi realizada a necropsia de todos os animais, sendo coletados fragmentos de tecidos, que foram remetidos a Faculdade de Veterinária (UFPel) para exames micológicos, bacteriológicos e histopatológicos.
No Laboratório de Micologia as amostras foram semeadas em Agar Sabouraud dextrose acrescido de cloranfenicol e incubadas por sete dias a 25°C, com observação diária. Após esse período foi feita a avaliação macro e microscópica das colônias. O exame direto foi realizado com a coloração Lactofenol azul de algodão, com lâmina sobreposta de lamínula.
Para os exames bacteriológicos o material foi semeado em duplicata em agar sangue e MacConkey, e incubadas à 37ºC por 48 horas. Após este período, foi realizado exame direto de todas as colônias através da coloração de Gram, e para classificação da espécie foram realizadas provas bioquímicas. 
Para o exame histopatológico foi realizada a fixação do material em formol 10%, inclusão em parafina e coloração com Hematoxilina-Eosina (HE) e Periodic Acid Schiff (PAS).

3. RESULTADOS
Dos 25 animais que vieram a óbito no CRAM no período do estudo, oito (32%) tiveram aspergilose como causa mortis, oito (32%) malária, quatro (16%) caquexia, dois (8%) infecções bacterianas, um (4%) bumblefoot, um (4%) lesões causadas por rede de pesca e um (4%) lesão por trauma, com luxação da articulação coxofemoral. 
Na necropsia de oito pingüins observou-se saco aéreo espessado e pulmões congestos, edemaciados e com granulomas variando de 0,1mm a 1,0cm. Sendo que alguns animais também apresentavam múltiplos granulomas na cavidade abdominal e lesões na siringe, fígado e rins. Ao exame direto na micologia foram visualizadas hifas regulares, septadas, com bifurcações em ângulo agudo, e estrutura de esporulação caracterizada por conidióforos com extremidade dilatada formando a vesícula, coberta pelas fiálides, que originavam os conídios. No exame histopatológico observou-se a presença de células gigantes multinucleadas, infiltrado inflamatório de células mononucleares, hifas invadindo os tecidos, bem como presença de estruturas completas de frutificação de Aspergillus no saco aéreo, confirmando o diagnóstico de aspergilose nesses animais. 
Em outras oito necropsias observou-se hepatomegalia, esplenomegalia e edema pulmonar. Dois destes animais apresentavam hemorragia cerebral, um apresentava ruptura de baço, um ascite e dois hidropericárdio.  Na histopatologia foram observados os esquizontes intracitoplasmáticos nas hemácias.
Quatro pingüins, sem lesões macroscópicas evidentes na necropsia, apresentaram péssimas condições gerais, com peso inferior a 2,0kg, apatia e desidratação. Os resultados dos exames micológico e bacteriológico foram negativos, confirmando a causa mortis de caquexia.
Em duas necropsias os pingüins, apresentaram sacos aéreos cobertos por exsudato caseoso. Em um dos animais observou-se uma massa amarelada de 4,0 cm de diâmetro no saco aéreo direito e no outro animal observou-se acúmulo de secreção mucopurulenta nos sacos aéreos. No exame bacteriológico do primeiro foram isoladas colônias de Acinetobacter sp., enquanto no segundo animal isolou-se Pseudomonas putida. O exame histopatológico confirmou o diagnóstico de infecção bacteriana.  
Um pingüim com bumblefoot em estágio avançado foi eutanasiado no CRAM. A ave apresentava lesões extensas com infecção degenerativa e comprometimento articular, e no exame bacteriológico do coxim plantar foram isoladas numerosas colônias de Corynebacterium sp.
Somente dois pingüins vieram a óbito por doenças não infecciosas, sendo um por lesões causadas por rede de pesca e um, eutanasiado por apresentar lesão traumática com luxação da articulação coxofemoral.

4. DISCUSSÃO
Dos animais que vieram a óbito nos 33 meses de estudo, 64% tiveram aspergilose ou malária como causa mortis. Em estudo realizado por Diebold et al. (1999) em zoológicos e aquários norte-americanos, a malária, a aspergilose e o bumblefoot são descritos como as doenças de maior ocorrência em pingüins de cativeiro, porém o bumblefoot é citado como doença de alta morbidade, não sendo descrito seu percentual de mortalidade.
Entre os 25 animais, 32% foram diagnosticados com malária, estes, eram provenientes do ZOOnit, no Estado do Rio de Janeiro, onde já foi registrada a ocorrência do Plasmodium juxtanucleare, espécie protozoária descrita como agente da malária aviária com altas taxas de morbidade e mortalidade (Prezoto, 2004). Em trabalho publicado por Grim et al. (2003) o P. juxtanucleare é relatado como causador da doença em cinco pingüins africanos (Spheniscus demersus) em um centro de reabilitação. O estudo também relata que os animais apresentavam esplenomegalia e edema pulmonar, o que concorda com os sinais observados na necropsia dos oito pingüins diagnosticados com malária no CRAM.
A aspergilose representou 32% das causas mortis entre o total de pingüins estudados, o que vai de acordo com Santamaria (2003), pois segundo o autor a micose é uma das principais causas de morte em pingüins em zoológicos e centros de reabilitação, correspondendo a 30% do número total de óbitos entre aves de cativeiro. A doença afeta principalmente o sistema respiratório destas aves marinhas, uma vez que os conídios provêm do ambiente e penetram no organismo, principalmente, pelo trato respiratório, causando a doença (Berchieri & Macari, 2000; Kearns & Loudis, 2003). Na necropsia dos oito pingüins diagnosticados com a micose observaram-se sinais de aspergilose respiratória, que, de acordo com Clarke & Kerry (1993) é a forma mais comum da doença. 
No nosso estudo o bumblefoot correspondeu a 4% das causas de morte, porém o resultado é discutível, uma vez que o animal foi eutanasiado, não havendo a garantia de que viesse a óbito naturalmente por septicemia. 
A literatura descreve a anorexia como conseqüência de doenças infecciosas ou intoxicações (Fowler & Cubas, 2001). Porém, os quatro pingüins que vieram a óbito por caquexia durante o período de estudo no CRAM, chegaram ao centro de reabilitação com estado geral comprometido, vindo a óbito em 24 a 48 horas de cativeiro.
Dois óbitos foram diagnosticados como decorrentes de infecção bacteriana. Diversas publicações afirmam que diferentes espécies de bactérias com potencial patogênico são encontradas na microbiota normal da pele e do trato respiratório e digestivo de animais sadios, podendo causar doenças quando quebradas as barreiras de defesa do organismo (Fowler & Cubas, 2001; Cubas & Godoy, 2004).
As duas mortes por doenças não infecciosas ocorridas no CRAM são descritas como comuns por Clarke & Kerry (1993). Os autores descrevem que os traumas podem ser decorrentes de causas naturais (principalmente predadores) ou de intervenção humana. Em uma das aves a causa da lesão é desconhecida, porém na outra, as lesões decorrentes de rede de pesca comprovam a intervenção humana como causa do traumatismo.

5. CONCLUSÃO
O trabalho relata diversas doenças que acarretam mortalidade de pingüins em cativeiro, as quais são raras em vida livre, e ressalta a importância dessas enfermidades no processo de reabilitação, destacando a aspergilose e a malária devido a maior ocorrência no CRAM durante o período de estudo.

6. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BERCHIERI, A. J.; MACARI, M. Enfermidades Micóticas., Doenças das Aves. FACTA – Fundação APINCO de Ciência e Tecnologia Avícolas. Campinas, São Paulo, 2000, p. 369 – 375.
CARRASCO, L.; LIMA JR, J. S.; HALFEN, D. C.; SALGUEIRO, F. J.; SÁNCHEZ-CORDÓN, P.; BECKEER, G. Systemic Aspergillosis in an Oiled Magallanic Penguin (Spheniscus megallanicus). Journal of Veterinary Medicine. B 48, p. 551 – 554, 2001
CLARKE, J.; KERRY, K. R.. Diseases and Parasites of penguins, Korean Journal of Polar Research. , 1993. v. 4 (2) p. 79-96.
CUBAS, Z. S.; GODOY, S. N. Algumas doenças de aves ornamentais., 2004 Disponível em <http://www.abma.com.br/2004/notes/207.pdf>
DIEBOLD, E. N.; BRANCH, S.; HENRY, L. Management of penguin populations in North Americans zoos and aquariums. Marine Ornitology 27: 171-176, 1999.
FOWLER, M; CUBAS, Z..Biology, Medicine and Surgery of South American Wild Animals. Iowa State University Press, 2001.
GRIM, K. C.; MERWE, E. V.; SULLIVAN, B. A.; PARSONS, N.; McCUTCHAN, T. F.; CRANFIELD, M. Plasmodium juxtanucleare associado com mortalidade em pinguins de pata preta (Spheniscus demersus) admitidos em um centro de reabilitação. Journal of Zôo and Wildlife Medicine 34(3): 250-255, 2003.
KEARNS, K. S.; LOUDIS B., Aspergilosis aviar., in Recent Advances in Avian Infectious Diseases, International Veterinary Information Service, Ithaca NY (www.ivis.org), 2003; A1902.0903.ES
PREZOTO, H. H. S.; D’AGOSTO, M.; DAEMON. E. Prevalência e variação dos estádios eritrócitos do Plasmodium (Novyella) juxtanucleare em Gallus gallus sob condições naturais, no período de um ano. Parasitologia Latinoamericana 59:14 – 20, 2004
SANTAMARIA, E. A., Aspergillosis in birds of prey. 2003. Disponível em <http//www.aspergillus.man.ac.uk>. Acesso em: 23 março 2005.
WIKIPÉDIA, a encyclopedia livre. 2006, Disponível em <http://pt.wikipedia.org/wiki/Pinguim-de-Magalhães>. Acesso em: 2006.